Lisozima ELISA

Imunoensaio enzimático para determinação quantitativa de Lisozima em matriz alimentar.

Introdução: O ovo de galinha (Gallus gallus) é muito rico em proteínas e representa uma importante fonte de alimento para os seres humanos. Embora as proteínas da gema de ovo tenham apenas uma alergenicidade menor, muitas proteínas da clara de ovo são conhecidas por serem alergénicas. Além da ovalbumina, ovotransferrina, ovomucóide e livetina, a lisozima representa um importante alérgeno. Principalmente a lisozima é usada como conservante na indústria do vinho e do queijo. Para pessoas alérgicas, o consumo de lisozima representa um problema crítico. Já quantidades muito baixas do alérgeno podem causar reações alérgicas, que podem levar ao choque anafilático em casos graves. Por causa disso, as pessoas alérgicas à lisozima devem evitar estritamente o consumo de alimentos que contenham lisozima. A adição não declarada de lisozima em alimentos é perigosa para pessoas alérgicas. A contaminação cruzada, principalmente em consequência do processo de produção, também é problemática. Desde 1º de julho de 2012, a União Europeia solicita a rotulagem de alérgenos para o vinho se as proteínas do leite ou do ovo forem usadas durante a produção e ainda estiverem presentes em um nível de deteção de 0,25 mg/L ou superior. Assim, para a deteção de resíduos de lisozima, são necessários sistemas de ensaio sensíveis.
Lisozima ELISA representa um sistema de deteção altamente sensível para lisozima e é particularmente capaz de quantificar resíduos de lisozima em vinho e queijo.

Descrição: O teste quantitativo de lisozima baseia-se no princípio do ensaio de imunoabsorção ligado a enzima. Um anticorpo dirigido contra a lisozima é ligado à superfície de uma placa de microtitulação. Amostras ou padrões contendo lisozima são colocados nos poços da placa de microtitulação. Após 20 minutos de incubação à temperatura ambiente, os poços são lavados com solução de lavagem diluída para remover o material não ligado. Um segundo anticorpo conjugado com peroxidase dirigido contra a lisozima é administrado nos poços e, após 20 minutos de incubação, a placa é lavada novamente. Uma solução de substrato é adicionada e incubada por 20 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor azul. O desenvolvimento da cor é inibido pela adição de uma solução stop e a cor fica amarela. A cor amarela é medida fotometricamente a 450 nm. A concentração de lisozima é diretamente proporcional à intensidade da cor da amostra de teste.

Características do produto:
- O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
- Placa de microtitulação composta por 12 tiras com 8 poços quebráveis;
- Padrões de lisozima: 0, 25, 50, 100, 250 ppb;
- Leitor de ELISA a 450 nm;
- Faixa padrão: 25 - 250 ppb;
- Sensibilidade analítica: vinho: 2 ppb; outros: 10 ppb.