Listeria monocytogenes é descrita como uma bactéria patogénica ubíqua, responsável principalmente por casos isolados e surtos de listeriose em seres humanos e animais. Quando foi descoberta pela primeira vez, ela era reconhecida apenas como perigosa para animais. Mais tarde, nos anos 80, devido a vários surtos de alimentos contaminados com esta bactéria, passou a ser considerada uma ameaça à saúde pública.
L. monocytogenes é uma bactéria Gram-positiva que pertence à família Listeriaceae. Esta bactéria pode crescer tanto na presença quanto na ausência de oxigénio e é considerada anaeróbia facultativa. L. monocytogenes tem células em forma de bastonete que são móveis devido à presença de flagelos.
As bactérias L. monocytogenes prosperam em condições específicas, incluindo amplitudes de temperatura de -0,4°C a 45°C, com crescimento ideal entre 30°C e 37°C. Podem sobreviver em alimentos congelados por períodos prolongados, mas podem ser eliminadas do leite por meio da pasteurização. Estas bactérias podem crescer em ambientes com valores de pH entre 4,3 e 9,4 e tolerar uma atividade de água (Aw) mínima de 0,92, bem como 10% de NaCl. Condições anaeróbias promovem seu crescimento, enquanto concentrações de CO2 superiores a 80% são inibitórias (1).
Comidas associadas a infeções por L. monocytogenes
As fontes de contaminação da Listeria monocytogenes incluem solo, água, ambientes de processamento de alimentos, alimentos crus e processados, reservatórios animais, contaminação cruzada e armazenamento e manipulação inadequados. A bactéria L. monocytogenes pode ser encontrada de forma ubíqua no solo, vegetais, carne e peixe, e pode ser transportada de forma assintomática tanto por animais como por seres humanos. Consequentemente, matérias-primas e alimentos não processados estão frequentemente contaminados. O risco de contaminação é particularmente elevado em produtos que não passam por nenhuma etapa de redução ou eliminação durante o processo de fabrico e cujas matérias-primas têm uma incidência maior de bactérias. Exemplos de alimentos suscetíveis incluem saladas, patês, queijos, leite pasteurizado, camarão e manteiga. Além disso, a taxa de crescimento rápido das bactérias e a falta de processamento antes do consumo aumentam o risco de contaminação em produtos como leite cru, derivados de leite cru, peixe fumado e certas salsichas (1).
Prevenção e proteção da contaminação
Garantir a completa ausência de L. monocytogenes não é viável, uma vez que ela pode ser encontrada em alimentos, especialmente em alimentos processados termicamente, o que indica más práticas de higiene. Para prevenir a contaminação e a contaminação cruzada, é crucial manter boas práticas de higiene e fabrico. A implementação de sistemas de autocontrole, como o HACCP (Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controlo), em toda a cadeia de produção é essencial para prevenir surtos.
Para se proteger contra a infeção por Listeria, é importante estar ciente dos alimentos de risco e evitá-los
- Leite cru (não pasteurizado) e queijos macios feitos a partir dele, incluindo queijos estilo mexicano pasteurizados como o queijo fresco. Têm sido associados a infeções por Listeria devido à contaminação durante o fabrico do queijo.
- Frios e cachorros-quentes devem ser completamente aquecidos antes do consumo.
- Sobras de comida devem ser prontamente refrigeradas em recipientes cobertos e rasos, e consumidas dentro de 3-4 dias.
- Evitar a contaminação cruzada na cozinha.
- Mantenha o frigorífico a uma temperatura de 4ºC ou inferior e o congelador a -18ºC ou inferior (2).
Para prevenir a contaminação por Listeria, siga estes passos
- Lave as paredes internas, prateleiras, tábuas de corte e utensílios da geladeira com água quente e sabão e, em seguida, higienize-os com uma solução de lixívia diluída em água quente.
- Limpe imediatamente derramamentos e limpe regularmente a geladeira.
- Lave as mãos com água morna e sabão por pelo menos 20 segundos antes e depois de manusear alimentos ou realizar qualquer procedimento de limpeza e higienização (2).
Certos grupos, como mulheres grávidas, idosos e indivíduos com sistemas imunológicos enfraquecidos, devem evitar alimentos de alto risco, incluindo leite cru/não pasteurizado, queijos feitos a partir de leite não pasteurizado, peixe cru, brotos de vegetais crus e outros alimentos crus que representam um alto risco de contaminação por L. monocytogenes. Os donos de animais de estimação devem tomar precauções para evitar a contaminação cruzada ao manusear a comida de seus animais. Os pratos de comida devem ser prontamente lavados após os animais terminarem de comer, e indivíduos com sistemas imunológicos enfraquecidos devem evitar o manuseio ou a exposição a alimentos ou animais potencialmente contaminados.
No caso de possível exposição a L. monocytogenes, é importante entrar em contacto com o departamento de saúde local e comunicar com os clientes. Os expositores e superfícies usados para armazenar, servir ou preparar alimentos potencialmente contaminados devem ser lavados e higienizados regularmente. Tábuas de corte e utensílios usados no processamento de alimentos também devem ser limpos e higienizados com frequência para minimizar o risco de contaminação cruzada. Os consumidores podem desempenhar um papel na prevenção de futuros surtos relatando voluntariamente reclamações ou eventos adversos (doenças ou reações alérgicas graves) relacionados a produtos alimentares.
Deteção de Listeria monocytogenes
O método de cultura em placa é um dos métodos de seleção para a deteção de Listeria monocytogenes. Amostras de alimentos geralmente contêm células danificadas, então é frequentemente necessária uma etapa de pré-enriquecimento não seletivo antes do enriquecimento seletivo e isolamento em meios de agar seletivos/diferenciais. Resultados negativos a partir do cultivo em placa podem levar de 3 a 4 dias para serem confirmados, enquanto resultados positivos podem levar de 5 a 7 dias (3).
Mesmo com o enriquecimento, a deteção pode ser desafiadora devido a fatores como alta população de microbiota competitiva, baixos níveis do patógeno e interferência de componentes alimentares inibitórios. Além disso, resultados falsos negativos podem ocorrer quando L. innocua cresce mais rápido do que L. monocytogenes em um meio de cultura comummente utilizado que não os diferencia (3).
Uma alternativa ao método de cultura é a deteção por PCR
Para uma análise mais rápida, eficiente e efetiva, a estratégia de qPCR é crucial. A análise pode levar de 1 a 2 dias, sendo a etapa de preparação da amostra a mais demorada. O método mais utilizado é a cultura de enriquecimento, que envolve uma etapa de pré-enriquecimento usando meio não seletivo do método de cultura. A cultura de enriquecimento permite o crescimento de uma única célula danificada para níveis de 103 UFC/mL, possibilitando sua deteção por PCR (4).
Na BPMR, aconselhamos a deteção deste organismo patogénico usando nosso KIT DE TESTE DE DETEÇÃO EM TEMPO REAL POR PCR Listeria monocytogenes para uma deteção precisa, confiável e rápida desse patogénico na sua amostra, reduzindo custos com perdas de matéria-prima ou prevenindo surtos.
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Foram realizados vários testes para garantir a qualidade do kit, incluindo inclusividade, sensibilidade e exclusividade:
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- Sensibilidade: Foi observada a amplificação do alvo em amostras contaminadas com 1-10 ufc/25 g ou mais.
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Referências:
- https://www.asae.gov.pt/seguranca-alimentar/riscos-biologicos/listeria-monocytogenes
- https://www.fda.gov/food/foodborne-pathogens/listeria-listeriosis
- Mester, P., Witte, A. K., & Rossmanith, P. (2021). Sample Preparation for qPCR Detection of Listeria from Food. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 2220, 31–40. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-0982-8_3
- Witte, A. K., Mester, P., & Rossmanith, P. (2021). qPCR Validation on the Basis of the Listeria monocytogenes prfA Assay. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 2220, 41–53. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-0982-8_4
