Aflatoxina Total ELISA

Imunoensaio enzimático para determinação quantitativa de Aflatoxinas em matriz alimentar.

Introdução: As aflatoxinas pertencem à classe das micotoxinas. Quimicamente são definidas como difuranociclopentanocumarinas ou difuranopentanolidocumarinas, ou seja, as aflatoxinas contêm um anel diidrofurano ou tetraidrofurano, ao qual é condensado um sistema cumarínico substituído. Das cerca de 20 aflatoxinas conhecidas, os fungos Aspergillus flavus e A. parasiticus produzem exclusivamente aflatoxinas B1, B2, G1 e G2, e todas as outras aflatoxinas são derivadas dessas quatro. Os derivados são desenvolvidos por metabolismo em humanos, animais e microorganismos ou por reações ambientais. Na União Europeia, os limites para aflatoxinas totais são de 4 a 15 ppb para alimentos. Assim, é obrigatório o monitoramento dos alimentos e rações em relação à concentração de aflatoxinas.
Aflatoxina ELISA total representa um sistema de detecção altamente sensível e é particularmente capaz de quantificar contaminações totais de aflatoxina em cereais, cerveja, nozes, frutas secas, óleos e pimenta.

Descrição: O teste quantitativo de aflatoxina total é baseado no princípio do ensaio imunoenzimático. Uma proteína de ligação ao anticorpo é revestida na superfície de uma placa de microtitulação. Aflatoxinas contendo amostras ou padrões, um conjugado aflatoxina-peroxidase e um anticorpo dirigido contra aflatoxinas são administrados nos poços da placa de microtitulação. O conjugado compete com as aflatoxinas de amostras/padrões pelo número limitado de sítios de anticorpos. Simultaneamente, o anticorpo anti-aflatoxina é ligado à proteína de ligação ao anticorpo revestida na placa de microtitulação. Após 30 minutos de incubação à temperatura ambiente, os poços são lavados com solução de lavagem diluída para remover o material não ligado. Uma solução de substrato é adicionada e incubada por 15 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor azul. O desenvolvimento da cor é inibido pela adição de uma solução stop e a cor fica amarela. A cor amarela é medida fotometricamente a 450 nm. A concentração de aflatoxinas é inversamente proporcional à intensidade da cor da amostra de teste.

Características do produto:
- O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
- Placa de microtitulação composta por 12 tiras com 8 poços quebráveis;
- Padrões de aflatoxina: 0, 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1.5 ng/mL;
- Leitor de ELISA a 450 nm;
- Faixa padrão: 0,05 – 1.5 ng/mL;
- Sensibilidade analítica: 0.015 ng/mL.